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SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測試樣品要求是什么？

來源：測試GO 時間：2022-11-03 10:10:41 瀏覽：2836次

SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）：SDS-PAGE（十二烷基硫酸鈉–聚丙烯酰胺）凝膠電泳是一種可以根據(jù)蛋白質(zhì)的分子量分離樣本中蛋白的技術(shù)。蛋白質(zhì)分子在聚丙烯酰胺凝膠中電泳時，它的遷移率取決于所帶凈電荷及分子的大小和形狀等因素。如果在聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中加入SDS和巰基乙醇，則蛋白質(zhì)分子的遷移率主要取決于它的分子量，而與所帶電荷和形狀無關(guān)。

樣品中靶標蛋白表達量的變化

選擇一系列不同分子量的球形或基本呈球形的蛋白質(zhì)作為標準物，使其形成SDS復(fù)合物。把這些復(fù)合物在相同條件下進行電泳分離，分子量小的物質(zhì)泳動距離大，分子量大的物質(zhì)泳動距離小。測定出相對泳動率，用相對泳動率對蛋白質(zhì)的分子量的對數(shù)作圖，它們在一定范圍內(nèi)呈直線關(guān)系。因此可作為標準曲線來檢測樣品蛋白質(zhì)的分子量。目前，SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）主要應(yīng)用在蛋白質(zhì)分子量測定、特異性蛋白質(zhì)檢測、菌種鑒定等方面。

SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳樣品要求：

1.檢測組織量要求為100mg（即黃豆大?。?/span>

2.細胞量要求為10^6及以上，細胞收集方式—— 貼壁細胞：倒掉培養(yǎng)基，pbs清洗2-3次，用細胞刮收集細胞，2000g，離心5min，然后去掉上清液，細胞沉淀干冰運輸；懸浮細胞：2000g，離心5min，然后收集細胞沉淀，干冰運輸；

3.血液樣本：全血采用EDTA-抗凝管裝，至少1ml，4度運輸，血清或白細胞采用干冰運輸；

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