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    TEM測(cè)試如何低速離心取材以及送樣方法?
    來(lái)源:測(cè)試GO 時(shí)間:2022-09-16 14:51:47 瀏覽:2187次

    在我們進(jìn)行TEM測(cè)試時(shí),低速離心取材以及送樣是實(shí)驗(yàn)的重要的一部分,下面教大家一個(gè)所有類(lèi)型均適用的細(xì)胞樣品操作方法:

    動(dòng)物組織的TEM圖

    1. 最好刮取細(xì)胞,收集在離心管中,1500 rpm離心5 ~ 10 min(初次離心參數(shù)可按自己的經(jīng)驗(yàn)調(diào)整,目的是不損傷細(xì)胞結(jié)構(gòu)的情況下去掉培養(yǎng)液成分)。

    2. 棄上清,加入常溫(平時(shí)固定液4℃保存,臨用前拿出復(fù)溫到室溫或體溫)的3%戊二醛固定液,重懸細(xì)胞。常溫固定2 min。

    3. 轉(zhuǎn)移至1.5 ml尖底EP管,2000 rpm離心10 min。此步離心后,細(xì)胞應(yīng)為約半顆綠豆大小。

    4. 用吸管小心棄上清,加入室溫的0.1M PB或等滲PBS,重懸細(xì)胞。再以1000 rpm離心5 ~10 min。

    5. 以相同條件重復(fù)上述重懸、離心步驟,再次漂洗細(xì)胞(不要偷懶,要洗第二遍)。

    6. 用吸管小心棄上清,加入預(yù)熱到40℃GT2(實(shí)驗(yàn)室提供的特殊固定液)專(zhuān)用溶液重懸細(xì)胞(輕輕搖勻或吹吸均可,不要有肉眼可見(jiàn)的大塊);立即以3000 rpm離心10 min。

    7. 用吸管盡快小心棄上清;然后密閉管蓋,轉(zhuǎn)入4℃靜置10 min(嚴(yán)禁結(jié)冰)。

    8. 沿管壁緩慢加入固定液,不要沖擊細(xì)胞團(tuán),靜置30 min后可送樣。

    重點(diǎn):

    1)固定和各項(xiàng)操作都是室溫條件,GT2(實(shí)驗(yàn)室提供的特殊固定液)本身要預(yù)熱到40℃GT2凝結(jié)前沒(méi)有需要預(yù)冷的步驟。

    2)取材完成后,在4℃保存,保存和運(yùn)輸期間嚴(yán)禁結(jié)冰(太靠近冰箱后壁或冰袋運(yùn)輸都可能使樣品結(jié)冰。冬季寧可常溫送樣)。

    3)觀察細(xì)胞連接的實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用消化的方法收集細(xì)胞。


    測(cè)試狗

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    文字是人類(lèi)用符號(hào)記錄表達(dá)信息以傳之久遠(yuǎn)的方式和工具?,F(xiàn)代文字大多是記錄語(yǔ)言的工具。人類(lèi)往往先有口頭的語(yǔ)言后產(chǎn)生書(shū)面文字,很多小語(yǔ)種,有語(yǔ)言但沒(méi)有文字。文字的不同體現(xiàn)了國(guó)家和民族的書(shū)面表達(dá)的方式和思維不同。文字使人類(lèi)進(jìn)入有歷史記錄的文明社會(huì)。
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